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맥아들, D. 더블유, 카치, I. F. & 캐치, L. V. 운동 생리학. 에너지, 영양 및 인간의 성능 (울터스 클루워 헬스 프레스, 메릴랜드, 1996). 인간 HeLa 세포는 10% FBS (Gibco) 및 1% 페니실린-스트렙토마이신(P/S) (완전한 배지)으로 보충된 덜베코의 변형된 독수리 배지(DMEM)(Hyclone)로 유리 커버슬립에 배양하였고, 하룻밤 동안 부착할 수 있었다. 플라스미드 pEGFP-N1(음성 대조군) 및 2개의 재조합 플라스미드는 리포펙타민 2000(Invitrogen)의 프로토콜에 따라 인간 HeLa 세포로 따로 형질감염되었다. 6시간 후, 배지는 400 uM 올레아테를 BSA(Sigma)(6:1 몰 비)로 착유하여 TAG 함유 지질 방울의 형성을 근화시키는 것으로 대체하였다62. 이들은 ATGL 리파아제에 대한 기질로서 사용되었고, 17시간 동안 배양하여 이어서 완전한 배지로 대체하였다. 24 시간 동안 또 다른 배양 후, 유리 커버슬립을 꺼내 서 PBS에 의해 3 회 세척했습니다.

세포를 1시간 동안 3.7% 포름알데히드 용액에 순차적으로 고정시키고, 탈이온수를 사용하여 3회 세척하고, 어둠 속에서 30분 동안 ORO로 염색하였다. 염색된 세포는 100X 오일 침지 목표 하에서 형광 현미경(Nikon Eclipse 80i)에 이미징을 적용하였다. 각 세포 유형에 대해, 무작위로 선택된 90개의 양성 세포로부터의 면역형광 이미지를 무작위로 채취하였고, 그 다음에 ImageJ63을 가진 지질 방울 수 및 영역의 정량화가 뒤따랐다. 상이한 세포 유형 간의 평균 비교는 R. 인간 배아 신장 293FT 세포에서 정상성 시험 후 t 시험에 의해 수행되었고, 10% FBS 및 1% P/S로 보충된 DMEM에서 성장하였다. pCDH-fACOT77, pCDH-fACOT7mut, pCDH-fATGL, pCDH-fATGLmut, 및 pCDH 플라스미드(음성 대조군)를 각각 리포펙타민 2000을 사용하여 도우미 플라스미드(psPAX2 및 pMD2.G)를 사용하여 세포내로 형질감염하였다. 배지를 6시간 후에 갱신하고, 렌티바이러스는 48시간 후에 수집되었고, 0.45 μm 필터(Millipore)를 통해 여과하였다. 모든 생명체는 탄수화물과 지방과 같은 에너지가 풍부한 화합물을 대사하여 필요한 에너지를 얻습니다. 대부분의 유기체에서, 이 물질 대사는 호흡에 의해 일어난다, 산소를 필요로하는 과정 (참조 6).

이 과정에서 이산화탄소 가스가 생성되며 신체에서 제거해야합니다. 공기 주머니는 폐를 통해 공기의 단방향 흐름을 허용합니다. 단방향 흐름은 조류 폐를 통해 이동하는 공기가 대체로 `신선한` 공기이며 산소 함량이 높다는 것을 의미합니다. 대조적으로, 공기 흐름은 포유동물에서 `양방향`으로, 폐안팎으로 그리고 나아간다. 그 결과, 포유류의 폐로 들어오는 공기는 `오래된` 공기(잠시 동안 폐에 있던 공기)와 혼합되며, 이 `혼합 공기`는 산소가 적습니다. 그래서, 조류 폐에서, 더 많은 산소는 혈액으로 확산 할 수 있습니다 (조류 호흡기).